Přeskočit na obsah

Buněčná linie RAW 264.7

Přidat odkazy
Z Wikipedie, otevřené encyklopedie

Buněčná linie RAW 264.7 je myší buněčná linie monocytů/makrofágů semi-adherentního typu ustanovena roku 1978.[1] Byla izolována z nádorového ascitu, který byl u BALB/c myší indukován pomocí intraperitoneální injekce viru Abelsonovy myší leukémie (Ab-MLV nebo A-MuLV).[2] Tato linie je v molekulární biologii jeden z nejběžněji používaných modelů myších makrofágů pro studium imunitní buněčné odpovědi již více než 40 let.

Vlastnosti

[editovat | editovat zdroj]

Oblíbenost této RAW264.7 buněčné linie je dána jejím rychlým množením a snadnou manipulací. Tato buněčná linie má dobu zdvojení 11 až 30 hodin. Velikost buněk RAW264.7 je typicky 10-20 µm v průměru.[3] Z pohledu fenotypu tato linie obsahuje jak fenotyp monocytů, tak makrofágů. Bez přidání zánětlivého stimulu se buňky chovají jako monocyty, avšak po jeho přidání dochází ke změně fenotypu a jejich aktivaci na makrofágy.[4]

RAW264.7 makrofágy M0 (nediferenciované makrofágy s potenciálem polarizace do dalších makrofágních podtypů) mohou být polarizovány na makrofágy M1 nebo M2.[5] Kromě toho jsou buňky RAW264.7 schopny pinocytózy a fagocytózy, což jsou obě kritické funkce makrofágů v těle.[6] Po stimulaci lipopolysacharidy (LPS) v nich může být indukována zánětlivá reakce.[7] Dojde tak ke zvýšení produkce oxidu dusnatého (NO) a urychlení fagocytózy. Kromě toho jsou tyto buňky schopny zabíjet cílové buňky i cytotoxicky.[8]

RAW264.7 je rakovinná buněčná linie, buňky mají tedy schopnost nekonečného dělení.[1]

Kultivace

[editovat | editovat zdroj]

Kultivace buněk RAW264.7 se standardně provádí v kultivační láhvi T75 nebo na Petriho misce. Udržovací fáze buněk RAW264.7 začíná po jejich adheraci k povrchu kultivační misky, což obvykle trvá asi 24 hodin.[9] Buňky jsou obvykle kultivovány v médiu DMEM (Dulbekova modifikace Eaglova media) s vysokým obsahem glukózy doplněného o 10% fetální hovězí sérum (fetal bovine serum, FBS) a 1% penicilin/streptomycin (či jiné antibiotikum), v atmosféře 5% C02 při 5% vlhkosti a 37 °C.[2] Růstové médium by mělo být obměňováno každé 2–3 dny, ale ne po více než 4 dnech.

Aktivace v monocytů v makrofágy probíhá přes zánětlivý stimul, například přidáním lipopolysacharidu (LPS).[4]

Využití

[editovat | editovat zdroj]

Tato monocytní/makrofágní buněčná linie se často se využívá k prvotnímu screeningu biologické aktivity přírodních látek a k predikci jejich potenciálního účinku in vivo nebo na primární buňky. Má se za to, že metabolická odezva této buněčné linie odráží potenciální lidskou reakci de novo a používá se proto k hodnocení účinné biologické aktivity látky.[10] Buněčná linie RAW264.7 je také široce používána pro hodnocení imunitní reaktivity a ke studiu osteoklastické diferenciace a jeho biologického molekulárního mechanismu.[10][11] Navíc se buňky RAW264.7 používají v ko-kulturách s jinými buněčnými liniemi pro lepší simulaci biologické tkáně.[12][13]

Odkazy

[editovat | editovat zdroj]

Reference

[editovat | editovat zdroj]
  1. ↑ a b RASCHKE, W.C.; BAIRD, S.; RALPH, P. Functional macrophage cell lines transformed by abelson leukemia virus. Cell. 1978-09, roč. 15, čís. 1, s. 261–267. Dostupné online [cit. 2023-04-23]. DOI 10.1016/0092-8674(78)90101-0. (anglicky) 
  2. ↑ a b TACIAK, Bartłomiej; BIAŁASEK, Maciej; BRANIEWSKA, Agata. Evaluation of phenotypic and functional stability of RAW 264.7 cell line through serial passages. PLOS ONE. 2018-06-11, roč. 13, čís. 6, s. e0198943. Dostupné online [cit. 2023-04-23]. ISSN 1932-6203. DOI 10.1371/journal.pone.0198943. PMID 29889899. (anglicky) 
  3. ↑ AMERICAN TYPE CULTURE COLLECTION (ATCC). RAW 264.7 [online]. [cit. 2023-04-23]. Dostupné online. 
  4. ↑ a b MARQUES, Lucia; PINHEIRO, Aruanã; ARAÚJO, João. Anti-Inflammatory Effects of a Pomegranate Leaf Extract in LPS-Induced Peritonitis. Planta Medica. 2016-06-28, roč. 82, čís. 17, s. 1463–1467. Dostupné online [cit. 2023-04-26]. ISSN 0032-0943. DOI 10.1055/s-0042-108856. (anglicky) 
  5. ↑ KHABIPOV, Aydar; KÄDING, Andre; LIEDTKE, Kim Rouven. RAW 264.7 Macrophage Polarization by Pancreatic Cancer Cells – A Model for Studying Tumour-promoting Macrophages. Anticancer Research. 2019-06-01, roč. 39, čís. 6, s. 2871–2882. PMID 31177125. Dostupné online [cit. 2023-04-23]. ISSN 0250-7005. DOI 10.21873/anticanres.13416. PMID 31177125. (anglicky) 
  6. ↑ HARTLEY, Janet W; EVANS, Leonard H; GREEN, Kim Y. Expression of infectious murine leukemia viruses by RAW264.7 cells, a potential complication for studies with a widely used mouse macrophage cell line. Retrovirology. 2008, roč. 5, čís. 1, s. 1. Dostupné online [cit. 2023-04-23]. ISSN 1742-4690. DOI 10.1186/1742-4690-5-1. PMID 18177500. (anglicky) 
  7. ↑ DONG, Lin; YIN, Lei; ZHANG, Yuanbin. Anti-inflammatory effects of ononin on lipopolysaccharide-stimulated RAW 264.7 cells. Molecular Immunology. 2017-03-01, roč. 83, s. 46–51. Dostupné online [cit. 2023-04-23]. ISSN 0161-5890. DOI 10.1016/j.molimm.2017.01.007. (anglicky) 
  8. ↑ FUENTES, Ana-Lucía; MILLIS, Leonard; VAPENIK, Jacqueline. Lipopolysaccharide-mediated enhancement of zymosan phagocytosis by RAW 264.7 macrophages is independent of opsonins, laminarin, mannan, and complement receptor 3. Journal of Surgical Research. 2014-06, roč. 189, čís. 2, s. 304–312. Dostupné online [cit. 2023-04-23]. DOI 10.1016/j.jss.2014.03.024. (anglicky) 
  9. ↑ CLS CELL LINES SERVICE GMBH. RAW 264.7 [online]. [cit. 2023-04-23]. Dostupné online. 
  10. ↑ a b MERLY, Liza; SMITH, Sylvia L. Murine RAW 264.7 cell line as an immune target: are we missing something?. Immunopharmacology and Immunotoxicology. 2017-03-04, roč. 39, čís. 2, s. 55–58. PMID 28152640. Dostupné online [cit. 2023-04-23]. ISSN 0892-3973. DOI 10.1080/08923973.2017.1282511. PMID 28152640. 
  11. ↑ CHENG, Yin; LIU, Haixia; LI, Jing. Evaluation of culture conditions for osteoclastogenesis in RAW264.7 cells. PLOS ONE. 2022-11-17, roč. 17, čís. 11, s. e0277871. Dostupné online [cit. 2023-04-23]. ISSN 1932-6203. DOI 10.1371/journal.pone.0277871. PMID 36395187. (anglicky) 
  12. ↑ MURATA, Tomiyasu; HASHIMOTO, Kazunori; KOHNO, Susumu. Chemical inducer of regucalcin attenuates lipopolysaccharide‐induced inflammatory responses in pancreatic MIN6 β‐cells and RAW264.7 macrophages. FEBS Open Bio. 2022-01, roč. 12, čís. 1, s. 175–191. Dostupné online [cit. 2023-04-23]. ISSN 2211-5463. DOI 10.1002/2211-5463.13321. PMID 34709731. (anglicky) 
  13. ↑ LIU, Peng-fei; CAO, Yan-wei; ZHANG, Shu-dong. A bladder cancer microenvironment simulation system based on a microfluidic co-culture model. Oncotarget. 2015-11-10, roč. 6, čís. 35, s. 37695–37705. Dostupné online [cit. 2023-04-23]. ISSN 1949-2553. DOI 10.18632/oncotarget.6070. PMID 26462177. (anglicky) 

Externí odkazy

[editovat | editovat zdroj]
Citováno z „https://cs.wikipedia.org/w/index.php?title=Buněčná_linie_RAW_264.7&oldid=23218357“