ELISA

Z Wikipedie, otevřené encyklopedie

ELISA (z angl. Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay), někdy také označovaná jako EIA (Enzyme Immunoassay) je jednou z nejpoužívanějších imunologických metod sloužících k detekci protilátek. Metoda funguje na bázi imunoenzymatické reakce a lze s ní rovněž detekovat i antigen. ELISA využívá dvou základních vlastností imunoglobulinů. Za prvé je to schopnost proteinů (tedy imunoglobulinů) vázat se na povrch umělých hmot (např. polystyrenu) a v druhé řadě pak schopnost vázat enzymy na Fc fragmenty (viz protilátka) imunoglobulinových molekul.

Pro průkaz specifických protilátek i antigenů existuje široké spektrum různých modifikací ELISA testu:

• Přímá ELISA - pro detekci antigenu.
• Nepřímá ELISA - pro deteci specifických protilátek.
• Přímá sendvičová ELISA - pro detekci antigenu.
• Nepřímá sendvičová ELISA - pro deteci specifických protilátek.

[editovat] Základní složky ELISA testu

1. Antigen
   • detekovaný v testovaném vzorku
   • známý, komerčně připravovaný
2. Protilátka
   • detekovaná v testovaném séru
   • známá, komernčně připravovaná
3. Konjugát
   • jedná se opět o protilátku proti protilátce (konkrétně proti druhově specifickým imunoglobulinům příslušného izotypu (proti IgG, IgM, IgA, viz protilátka), na kterou je navázaný enzym (konjugovaná enzymem)
4. Substrát
   • je chemická látka, která reaguje s enzymem a tím změní svou barvu

[editovat] Praktické použití

Metody ELISA se využívají k diagnostice infekčních nemocí člověka a zvířat. Stanovují se buď protilátky proti konkrétnímu patogenu nebo se detekují přímo prionové, virové, bakteriální, parazitární antigeny. Dále se použivají k detekci některých toxinů, hormonů, celé řady proteinů, případně dalších bioaktivních látek. Vědci pracují i na vývoji metod ELISA pro kosmický výzkum, například k detekci forem života na Marsu.

[editovat] Bibliografie

• Toman M. a kol.: Veterinární imunologie. Grada Publishing, Praha, 2000.
• Tijssen P.: Practice and Theory of Enzyme Immunoassays. Elsevier, Amsterdam, 1985.
• Tizard, I.R.: Veterinary Immunology - an introduction. Saunders co., Philadelphia, 1996.