Buněčná linie HeLa9903

Buněčná linie HeLa9903 je lidská tkáňová kultura stabilně transfekovaná expresním konstruktem hERα a reportérovým konstruktem luciferasy^[1]. Buněčná linie HeLa9903 je používána pro studium interakce chemických látek s estrogenovým receptorem.

Charakteristika[editovat | editovat zdroj]

HeLa9903 (ECACC 11033105) je odvozena od buněčné linie HeLa, která byla získána z cervikálního karcinomu (karcinom děložního hrdla) 31leté ženy^[2]. HeLa9903 je navíc stabilně transfekována dvěma konstrukty^[1]:

expresní konstrukt hERα, který je kompletním genem kódujícím lidský estrogenový receptor
konstrukt pro luciferasu světlušky, který nese pět tandemových repetic vitellogeninového estrogen responzivního elementu řízeného myším metalotioneinovým prostorovým TATA prvkem

Využití[editovat | editovat zdroj]

Buněčná linie slouží k ověření schopnosti látek vázat se vázat se, ať jako agonista nebo antagonista, na estrogenové receptory. In vitro testy s buněčnou kulturou HeLa9903 jsou součástí testovacího protokolu OECD pro detekci chemikálií s potenciální estrogenovou aktivitou^[3].

Kultivace[editovat | editovat zdroj]

Pro kultivaci je doporučeno médium DMEM bez fenolové červeně s 2mM glutaminem, 10 % FBS, 16 μg/ml blasticidinu a 800 μg/ml G418.^[1] Alternativně může být také použito médium EMEM bez fenolové červeně s 60 mg/l kanamycinu a 10 % DCC-FBS^[3].

Odkazy[editovat | editovat zdroj]

Reference[editovat | editovat zdroj]

↑ ^a ^b ^c ECACC. HeLa9903. www.culturecollections.org.uk [online]. [cit. 2023-04-29]. Dostupné online.
↑ ECACC. HeLa. www.culturecollections.org.uk [online]. [cit. 2023-04-29]. Dostupné online.
↑ ^a ^b OECD (2021), Test No. 455: Performance-Based Test Guideline for Stably Transfected Transactivation In Vitro Assays to Detect Estrogen Receptor Agonists and Antagonists, OECD Guidelines for the Testing of Chemicals, Section 4, OECD Publishing, Paris https://doi.org/10.1787/9789264265295-en

Související články[editovat | editovat zdroj]

HeLa

Externí odkazy[editovat | editovat zdroj]

Buněčná linie HeLa9903 v databázi Cellosaurus

[:0-1] ECACC. HeLa9903. www.culturecollections.org.uk [online]. [cit. 2023-04-29]. Dostupné online.

[2] ECACC. HeLa. www.culturecollections.org.uk [online]. [cit. 2023-04-29]. Dostupné online.

[:1-3] OECD (2021), Test No. 455: Performance-Based Test Guideline for Stably Transfected Transactivation In Vitro Assays to Detect Estrogen Receptor Agonists and Antagonists, OECD Guidelines for the Testing of Chemicals, Section 4, OECD Publishing, Paris https://doi.org/10.1787/9789264265295-en

[1]

[2]

[3]