Hovězí sérový albumin

Z Wikipedie, otevřené encyklopedie
Skočit na navigaci Skočit na vyhledávání
Hovězí sérový albumin

Hovězí sérový albumin (BSA, bovine serum albumine) je jedním z mnoha albuminů (proteinů krevního séra).

Laboratorní použití[editovat | editovat zdroj]

BSA je jedním ze základních proteinů v biochemické laboratoři a nachází uplatnění v mnoha experimentech. Nejčastější použití:

Vlastnosti BSA[editovat | editovat zdroj]

Řetězec obsahuje 583 aminokyselin, které jsou větveny do dvou řetězců.

Fyzikální vlastnosti BSA:

  • Počet aminokyselinových zbytků: 583
  • Molekulární váha: 66,463 Da (= 66.5 kDa)
  • izoelektrický bod ve vodě při 25 °C: 4.7[1]
  • Extinkční koeficient 43,824 M−1cm−1 při 279 nm[2]
  • Velikost: 140 × 40 × 40 Å (protáhlý elipsoid, kde a = b < c)[3]
  • pH 1% roztoku: 5.2-7[4][5]
  • Optická rotace: [α]259: -61°; [α]264: -63°
  • Stokesův poloměr (rs): 3.48 nm[6]
  • Sedimentační konstanta, S20,W × 1013: 4.5 (monomer), 6.7 (dimer)[4][5]
  • Difuzní konstanta, D20,W × 10−7 cm2/s: 5.9[4][5]
  • Částečný specifický objem, V20: 0.733[4][5]
  • Vnitřní viskozita, η: 0.0413[4][5]
  • Frikční koeficient, f/f0: 1.30[4][5]
  • Přírustek indexu lomu (578 nm) × 10−3: 1.90[4][5]
  • Optická absorbance, A279 nm1 g/L: 0.667[4][5]

Izolace BSA[editovat | editovat zdroj]

Vzorek hovězího sérového albuminu (BSA)

BSA tvoří asi 50 % všech proteinů séra skotu. Izoluje se tzv. Cohnovým procesem (extrakcí), která využívá rozdílné rozpustnosti BSA a jiných sérových proteinů v prostředích o různém pH, koncentraci ethanolu, iontové síle a teplotě. Víceméně čistý BSA (s příměsí imunoglobulinů) se označuje také jako V. Cohnova frakce. Pokud je zapotřebí ještě větší čistoty, je nutné tuto frakci podrobit dalšímu přečištění (např. chromatografii na Blue-Sepharose). Za nativních podmínek se vyskytuje jako směs monomeru a dimeru.

Biologická funkce BSA[editovat | editovat zdroj]

Díky hydrofobní kapse na svém povrchu slouží v krvi jako nosič hydrofobních látek, které by měly jinak příliš nízkou rozpustnost (např. steroidní hormony) podobně jako jiné analogické sérové albuminy (např. lidský sérový albumin – HSA, prasečí sérový albumin – PSA). Díky vysoké koncentraci BSA v krvi se významně uplatňuje i jako pufrační činidlo a napomáhá tak udržovat stabilní pH krve.

Reference[editovat | editovat zdroj]

  1. Ge S, Kojio K, Takahara A, Kajiyama T (1998). "Bovine serum albumin adsorption onto immobilized organotrichlorosilane surface: influence of the phase separation on protein adsorption patterns". Journal of Biomaterials Science. Polymer Edition9 (2): 131–50. doi:10.1163/156856298x00479PMID 9493841.
  2. Peters T (1975). Putman FW, ed. The Plasma Proteins. Academic Press. pp. 133–181.
  3. Wright AK, Thompson MR (Feb 1975). "Hydrodynamic structure of bovine serum albumin determined by transient electric birefringence"Biophysical Journal15 (2 Pt 1): 137–41. doi:10.1016/S0006-3495(75)85797-3PMC 1334600PMID 1167468.
  4. a b c d e f g h Putnam FW (1975). The Plasma Proteins: Structure, Function and Genetic Control1 (2nd ed.). New York: Academic Press. pp. 141, 147. ASIN B007ESU1JQ.
  5. a b c d e f g h Albumin from bovine serum" (PDF). Sigma-Aldrich. Retrieved 5 July 2013.
  6. Axelsson I (May 1978). "Characterization of proteins and other macromolecules by agarose gel chromatography". Journal of Chromatography A152 (1): 21–32. doi:10.1016/S0021-9673(00)85330-3.