Buněčná linie 3T3-L1

Z Wikipedie, otevřené encyklopedie
Klon adherentní buněčné linie 3T3-L1. Buňky jsou charakteristické svým protáhlým tvarem s dvěma úpony.

Buněčná linie 3T3-L1 je myší buněčná linie preadipocytů adherentního typu. Izolace této buněčné linie spočívala v klonování myších 3T3-L1 embryonálních fibroblastů, které ve velké míře akumulovaly lipidy ve formě tukových kapének [1]. Tato linie je vysoce využívaná ve studiu molekulární biologie.

Červené tukové kapénky produkované 3T3-L1 adipocyty obarvené roztokem Oil Red O.

Kultivace 3T3-L1[editovat | editovat zdroj]

Myší embryonální fibroblasty 3T3-L1 se kultivují nejčastěji v Dulbecco´s Modified Eagle´s Medium (DMEM) obohaceném o 10 % fetálního bovinního séra (FBS) či 10 % telecího séra (CS) a přídavkem 4 mM glutaminu. Podmínky pro kultivaci zahrnují 5% atmosféru CO2 a teplotu 37 ºC [2].

Diferenciace 3T3-L1 preadipocytů v adipocyty[editovat | editovat zdroj]

Po dosažení konfluence je k buňkám přidán "růstový koktejl" skládající se z dexamethasonu, isobutylmethylxanthinu a insulinu. Tyto složky působí jako induktory adipogeneze neboli diferenciace preadipocytů v adipocyty [2]. Jeden z možných způsobů kvantifikace produkce TAG buňkami je obarvení konfluentních klonů barvivem Oil Red O, následně dané barvivo vyvázat 100% isopropanolem a měřit absorbanci při 500 nm [3].

Využití buněčné linie 3T3-L1[editovat | editovat zdroj]

Využití buněčné linie 3T3-L1 preadipocytů je velice rozmanité. Pro jejich schopnost aktivace enzymů podílejících se na syntéze mastných kyselin a TAG se využívají k testování léků, které mají efekt na akumulaci tuků v buňkách. Využívají se též pro výzkum v oblasti působení oxidativního stresu [4], obesity [5], diabetu [6] a rakoviny [7].

Odkazy[editovat | editovat zdroj]

Reference[editovat | editovat zdroj]

  1. ↑ GREEN, Howard; KEHINDE, Olaniyi. Sublines of mouse 3T3 cells that accumulate lipid. Cell. 1974-03-01, roč. 1, čís. 3, s. 113–116. Dostupné online [cit. 2022-05-15]. ISSN 0092-8674. DOI 10.1016/0092-8674(74)90126-3. (English) 
  2. ↑ a b ZEBISCH, Katja; VOIGT, Valerie; WABITSCH, Martin. Protocol for effective differentiation of 3T3-L1 cells to adipocytes. Analytical Biochemistry. 2012-06-01, roč. 425, čís. 1, s. 88–90. Dostupné online [cit. 2022-05-15]. ISSN 0003-2697. DOI 10.1016/j.ab.2012.03.005. (anglicky) 
  3. ↑ BENCHAMANA, Ameena; MORI, Hiroyuki; MACDOUGALD, Ormond A. Regulation of adipocyte differentiation and metabolism by lansoprazole. Life Sciences. 2019-12, roč. 239, s. 116897. Dostupné online [cit. 2022-06-01]. DOI 10.1016/j.lfs.2019.116897. PMID 31644894. (anglicky) 
  4. ↑ RUDICH, A; TIROSH, A; POTASHNIK, R. Prolonged oxidative stress impairs insulin-induced GLUT4 translocation in 3T3-L1 adipocytes.. Diabetes. 1998-10-01, roč. 47, čís. 10, s. 1562–1569. Dostupné online [cit. 2022-05-15]. ISSN 0012-1797. DOI 10.2337/diabetes.47.10.1562. 
  5. ↑ Validate User. academic.oup.com [online]. [cit. 2022-05-15]. Dostupné online. DOI 10.3945/jn.108.100966. 
  6. ↑ THOMSON, Michael J.; WILLIAMS, Martin G.; FROST, Susan C. Development of Insulin Resistance in 3T3-L1 Adipocytes *. Journal of Biological Chemistry. 1997-03-21, roč. 272, čís. 12, s. 7759–7764. PMID: 9065437. Dostupné online [cit. 2022-05-15]. ISSN 0021-9258. DOI 10.1074/jbc.272.12.7759. PMID 9065437. (English) 
  7. ↑ HWANG, Sung-Hee; LEE, Michael. Autophagy inhibition in 3T3-L1 adipocytes breaks the crosstalk with tumor cells by suppression of adipokine production. Animal Cells and Systems. 2020-01-02, roč. 24, čís. 1, s. 17–25. Dostupné online [cit. 2022-05-15]. ISSN 1976-8354. DOI 10.1080/19768354.2019.1700159. PMID 32158612. (anglicky) 

Externí odkazy[editovat | editovat zdroj]

Citováno z „https://cs.wikipedia.org/w/index.php?title=Buněčná_linie_3T3-L1&oldid=21413819“