Barvení (biologie)

Z Wikipedie, otevřené encyklopedie
Skočit na: Navigace, Hledání
Plicní tkáň pacienta s emphysemou barveno hematoxylinem a eosinem.
Na tento článek je přesměrováno heslo Barvení. Tento článek pojednává o biochemické metodě. O zušlechťování textilních výrobků pojednává článek Barvení textilií.

Barvení je biochemická metoda, kterou se přidá k substrátu specifická barvící látka (barvivo) a slouží v biologii na prokázání výskytu (kvalifikaci) nebo množství (kvantifikaci) specifické látky ve zkoumané tkáni nebo v pletivu, nebo k obarvení celých struktur a objektů, které zlepšuje nebo umožňuje jejich pozorování optickým mikroskopem.

Užívaná barviva[editovat | editovat zdroj]

abecedně:

Barvicí metody[editovat | editovat zdroj]

Existuje mnoho detailně rozpracovaných barvících metod, z nejvýznamnějších je možné uvést:

Barvení mukopolysacharidů[editovat | editovat zdroj]

Mukopolysacharidy se barví směsí PAS, alciánové modři a hematoxylinu, a to tímto postupem:

  1. odparafínování: xylen 1 (5 min.), xylen 2 (5 min.), alkohol 1 (5 min.), alkohol 2 (5 min.), oplach v destilce
  2. kyselina jodistá 0,5 % 5 minut
  3. praní vodou 2-3 min, oplach destilovanou vodou
  4. Schiffovo reagens 20-30 min
  5. tekoucí voda 10 min., oplach destilovanou vodou
  6. alciánová modř (před použitím se doporučuje přefiltrovat) 1-2 hod.
  7. oplach vodou
  8. hematoxylin 5 min.
  9. praní 20 min., oplach destilovanou vodou, oplach absolutním alkoholem, xylen 3 (5 min.), xylen 4 (5 min.), montování

Výsledek:

  • neutrální mukopolysacharidy a glykogen - červeně
  • kyselé mukopolysacharidy - modrozeleně
  • jádra - modře hematoxylinem

Barvení kolagenních vláken[editovat | editovat zdroj]

Kolagenní vlákna je možné barvit za použití saturnové červeni a Weigertova železitého hematoxylinu:

  1. odparafínování: xylen 1 (5 min.), xylen 2 (5 min.), alkohol 1 (5 min.), alkohol 2 (5 min.)
  2. důkladně proprat ve vodě
  3. Weigertův železitý hematoxylin (roztok A + roztok B 1 : 1) 5 min. nebo gallocyanin 24 hod.
  4. praní v tekoucí vodě 5-10 min.
  5. saturnová červeň 1-20 min. (10 ml 1 % roztoku saturnové červeně + 90 ml nasyceného roztoku kys. pikrové)
  6. několikrát oplach v absolutním alkoholu, xylen 3, xylen 4, montování

Výsledek:

Barvení elastických vláken[editovat | editovat zdroj]

(orcein + hematoxylin)

  1. odparafínování: xylen 1 (5 min.), xylen 2 (5 min.), alkohol 1 (5 min.), alkohol 2 (5 min.), oplach v destilované vodě
  2. orcein 6-8 hod. při teplotě 38-40 °C
  3. oplach destilovanou vodou
  4. oplach kyselým alkoholem 70 %
  5. praní ve vodě
  6. hematoxylin 5 min.
  7. praní 20 min., oplach destilovanou vodou, oplach absolutním alkoholem, xylen 3, xylen 4, montování

Výsledek:

Giemsovo barvení[editovat | editovat zdroj]

Podrobnější informace naleznete v článku Giemsovo barvení.

Gramovo barvení[editovat | editovat zdroj]

Podrobnější informace naleznete v článku Gramovo barvení.

Základní barvící metoda v mikrobiologii. Barvíme fixovaný preparát.

  1. krystalová violeť na 20s - oplach ve vodě
  2. Lugolův roztok na 20s - oplach ve vodě
  3. aceton - odbarvení (dokud odtéká barva z preparátu)
  4. Karbolfuchsin na 20s - oplach ve vodě.

Externí odkazy[editovat | editovat zdroj]

Logo Wikimedia Commons
Wikimedia Commons nabízí obrázky, zvuky či videa k tématu

Metody:

Barviva: